草豆蔻含量检测高效液相色谱法

草豆蔻高效液相色谱仪检测方法

草　　豆　　蔻

增修订

【含量测定】　挥发油　照挥发油测定法(附录X　D)测定。

本品含挥发油不得少于1.0％(ml／g)。

（2）黄酮和桤木酮　　照高效液相色谱法（附录Ⅵ　D）测定。

色谱条件与系统适用性试验　　以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水为流动相A，以甲醇为流动相B，按下表进行梯度洗脱，检测波长为300　nm。理论板数按小豆蔻明峰计算应不低于5000。

时间　（分钟） 流动相A（%） 流动相B（%）

0～20

20～21

21～31

31～32

32～42

42～45 40

40→26

26

26→20

20

20→5 60

60→74

74

74→80

80

80→95

对照品溶液的制备　　取山姜素、乔松素、小豆蔻明和桤木酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1　ml含山姜素、乔松素、小豆蔻明和桤木酮分别为0.04mg、0.04mg、0.04mg和0.080mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备　　取本品粉末（过三号筛）0.5　g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50　ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。　　

测定法　　分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5　µl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品按干燥品计算，含黄酮以山姜素（C16H14O4）、乔松素（C15H12O4）、小豆蔻明（C16H14O4）总和计，不得少于1.35　%，桤木酮（C19H18O）不得少于0.50　%。

赛尔泰Syltech500型高效液相色谱仪（单泵配置）

1 泵 P501型恒流高压输液泵

1.1 液体输送原理： 双柱塞串联往复方式，自动脉冲抑制系统，另配有溶剂压缩因子程序，能自动补偿流量，液体输送更精准

1.2 最大输送压力： 大于等于6000PSI（约42MPa以上）

1.3 流速精度： 0.1%

1.4 流速范围： (0.001-10.000)mL/min最小增量0.001mL/min

1.5 柱塞杆清洗： 不需另配设备即可自动柱塞杆清洗，保护柱塞杆

1.6 安全性： 配有开机自检，高低压报警和保护功能

1.7 梯度系统：

1.7.1 混合范围： 0到100%

1.7.2 混合原理： 高压混合

1.7.3 混合液体数： 大于等于2元

1.7.4 脱气装置： 内外置脱气均可

2 紫外检测器 UV501型紫外可变波长检测器

2.1 光源： 氘灯（钨灯可选）

2.2 波长范围： 190到720nm

2.3 波长准确度： <1nm

2.4 波长重现性： <0.5nm

2.5 带宽： 小于5nm

2.6 噪音： <2.5*10-5AU（特定条件下）

2.7 漂移： <2.5*10-4AU（特定条件下）

2.8 流通池体积： 10ul

2.9 吸收量程： 0.01AU/V-10AU/V（共十档）

2.10 功能： 具有定点波长测量，数据处理硬件嵌入检测器，数字信号直接采集处理功能

3 色谱柱： C18柱、配保护柱

4 柱温箱： 室温上10度到100度（0.1度增量）

5 工作站： 中文操作软件，支持WIN9X/XP/2000/2003等操作系统，硬件嵌入检测器，数字信号直接采集处理

6 进样器： 7725i手动进样阀（带远程触发开关），自带20UL定量